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為什么選擇?恒譜生?色譜耗材

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一、色譜分析保護柱的常見問題解答

 

 

1、保護柱是否會影響樣品分析?

 

安裝保護柱確實會對分離度和柱效產(chǎn)生一定影響，因為保護柱中間存在死體積。但如果保護柱安裝得當(dāng)，并且經(jīng)常更換，這種影響通常不大。對于某些分析，如頭孢類抗生素的原料藥，可以根據(jù)色譜柱的損耗選擇是否添加保護柱;而對于制劑，如果輔料干擾嚴重或流動相鹽分較大，則建議使用保護柱。

 

 

2、保護柱的使用成本是否過高?

 

保護柱的成本通常約為色譜柱采購價的10%-20%。雖然保護柱會增加一定的成本，但通過定期更換保護柱，可以有效延長色譜柱的使用壽命，從長遠來看，總體成本是合理的。

 

 

3、保護柱的再生方法是什么?

 

保護柱的再生通常采用反接沖洗的方式。例如，可以用10%甲醇水沖洗30分鐘，然后用純甲醇沖洗30分鐘。不過，再生后的保護柱性能可能會有所下降，因此建議定期更換保護柱以確保最佳效果。

 

 

4、保護柱和在線過濾器的區(qū)別是什么?

 

在線過濾器主要用于過濾大于篩板孔徑的雜質(zhì)，死體積較小，清洗方便。而保護柱不僅能過濾固體雜質(zhì)，還能吸附強極性、強酸性或強堿性物質(zhì)，對色譜柱進行更全面的保護。不過，保護柱的死體積較大，可能會對分離效率產(chǎn)生一定影響。

 

 

二、色譜分析保護柱的應(yīng)用

 

 

1、藥物分析領(lǐng)域

 

在藥物研發(fā)和質(zhì)量控制中，色譜保護柱能夠有效去除藥物樣品中的雜質(zhì)，如合成殘留物、中間體、催化劑等，確保分析柱對藥物主成分及其雜質(zhì)的準(zhǔn)確分離和定量分析。例如，在抗生素藥物的分析中，保護柱可防止蛋白質(zhì)等大分子雜質(zhì)污染分析柱。

 

 

2、環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域

 

對于環(huán)境水樣、土壤提取物等復(fù)雜樣品的分析，保護柱可以過濾掉樣品中的泥沙、膠體等雜質(zhì)，避免這些雜質(zhì)對分析柱的污染，從而提高分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

 

 

3、食品安全檢測領(lǐng)域

 

在食品樣品的分析中，保護柱能夠去除樣品中的顆粒物和強保留物質(zhì)，防止分析柱堵塞和污染，確保色譜柱的分離性能和使用壽命。

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三、色譜分析保護柱的技術(shù)原理

 

 

1、雜質(zhì)吸附與截留

 

保護柱中的填充材料能夠?qū)悠分械碾s質(zhì)進行吸附和截留，防止這些雜質(zhì)進入分析柱，從而避免分析柱被污染和損壞。

 

 

2、防止固定相污染

 

保護柱可以截留與固定相發(fā)生不可逆反應(yīng)的化合物，避免這些化合物污染分析柱中的固定相，從而維持色譜柱的分離性能。

 

 

3、維持系統(tǒng)穩(wěn)定性

 

保護柱通過去除樣品中的雜質(zhì)，有助于維持系統(tǒng)的壓力穩(wěn)定，保證流動相的流速均勻性，減少因雜質(zhì)積累而導(dǎo)致的基線噪聲和漂移現(xiàn)象。

 

 

如何選擇色譜保護柱的規(guī)格型號

 

 

選擇色譜保護柱的規(guī)格型號需綜合考慮分析柱參數(shù)、樣品特性、儀器兼容性及實驗需求，以下是具體維度和選型建議：

 

一、固定相匹配：確保分離行為一致

 

保護柱的固定相需與分析柱完全一致，包括填料類型、鍵合相、孔徑和碳載量等，否則可能導(dǎo)致保留時間偏移或分離度下降。

 

 

二、尺寸參數(shù)匹配：減少死體積影響

 

保護柱的內(nèi)徑、長度和填料粒徑需與分析柱嚴格匹配，避免柱效損失或峰展寬。

 

1.?內(nèi)徑（ID）

 

必須與分析柱完全一致，常見規(guī)格：

 

常規(guī) HPLC：4.6 mm(搭配 4.6 mm 分析柱)

 

UHPLC：2.1 mm(搭配 2.1 mm 分析柱)

 

微徑柱：1.0 mm(搭配 1.0 mm 分析柱)

 

2.?長度

 

常規(guī)長度：5–20 mm(過長可能增加死體積)

 

簡單樣品：可選 5–10 mm 短柱(如食品中農(nóng)藥殘留分析)

 

復(fù)雜樣品：建議 10–20 mm 長柱(如生物樣品中的雜質(zhì)攔截)

 

3.?填料粒徑

 

需與分析柱相同，例如：

 

分析柱為 5 μm 填料 → 保護柱選 5 μm

 

UHPLC 分析柱為 1.7 μm 填料 → 保護柱選 1.7 μm

 

 

三、化學(xué)兼容性：適應(yīng)流動相條件

 

1.?pH 耐受范圍

 

根據(jù)流動相 pH 選擇保護柱基質(zhì)：

 

硅膠基質(zhì)：適用于 pH 2–8(如常規(guī)反相 / 正相分析)

 

聚合物基質(zhì)：適用于 pH 1–14(如極端酸堿條件下的肽類分析)

 

2.?耐溶劑性

 

確保保護柱填料與流動相有機溶劑兼容：

 

避免正相保護柱接觸含水性流動相(如硅膠柱遇水可能坍塌)

 

反相保護柱需耐受高比例有機相(如乙腈、甲醇)

 

 

四、樣品特性：針對性攔截雜質(zhì)

 

1.?雜質(zhì)類型

 

顆粒雜質(zhì)：優(yōu)先選篩板孔徑小的保護柱(如 2 μm 篩板攔截細微顆粒)

 

強保留物質(zhì)：

 

蛋白質(zhì) → 選蛋白質(zhì)兼容型保護柱

 

金屬離子 → 選螯合型保護柱

 

極性 / 非極性雜質(zhì)：根據(jù)樣品極性選擇對應(yīng)固定相(如極性樣品用極性保護柱預(yù)吸附)

 

2.?樣品復(fù)雜度

 

簡單樣品(如純品溶液)：可選通用型保護柱(如 C18)

 

復(fù)雜樣品(如血清、土壤提取物)：

 

選專用保護柱

 

 

五、儀器兼容性：適配系統(tǒng)壓力與流速

 

1.?耐壓能力

 

HPLC 系統(tǒng)：保護柱耐壓需≥400 bar(常規(guī) HPLC 壓力)

 

UHPLC 系統(tǒng)：需選耐壓≥1200 bar 的保護柱

 

2.?連接方式

 

確保接口與儀器匹配：

 

常規(guī)螺紋接口(如 1/16 英寸)

 

UHPLC 專用接口(如 Eka-Chem 或 Peek 材質(zhì)，減少死體積)

 

 

六、品牌與型號適配：優(yōu)先原廠或兼容替代

 

1.?原廠保護柱

 

優(yōu)勢：與分析柱參數(shù)完全匹配，性能穩(wěn)定

 

2.?第三方兼容保護柱

 

需驗證兼容性：

 

檢查固定相參數(shù)(如碳載量、孔徑)

 

測試保留時間重復(fù)性(偏差應(yīng)<5%)

 

 

七、選型流程示例

 

場景：使用恒譜生C18(4.6 mm×150 mm，5 μm，pH 2–8)分析血漿中的藥物殘留。

 

選型步驟：

 

固定相：選 C18 保護柱(如 恒譜生C18色譜柱)。

 

尺寸：內(nèi)徑 4.6 mm，長度 10 mm，填料 5 μm。

 

化學(xué)兼容性：流動相 pH 3–7.選硅膠基質(zhì)(耐 pH 范圍匹配)。

 

雜質(zhì)類型：血漿含蛋白質(zhì)，選帶蛋白質(zhì)攔截功能的保護柱(如內(nèi)置蛋白捕集層)。

 

儀器：常規(guī) HPLC，耐壓≥400 bar 即可。

 

 

注意事項

 

避免過度依賴再生：保護柱再生僅限輕度污染，強保留雜質(zhì)需及時更換。

 

預(yù)實驗驗證：新保護柱使用前，進空白樣品確認無鬼峰或基線干擾。

 

記錄維護日志：追蹤保護柱使用次數(shù)、柱壓變化，優(yōu)化更換周期。

 

通過以上維度綜合考量，可精準(zhǔn)選擇適配的色譜保護柱，最大化提升分析柱壽命與數(shù)據(jù)可靠性。如需特定品牌或應(yīng)用場景的選型建議，可進一步提供細節(jié)!